基因打靶:是指通過DNA定點同源重組,改變基因組中的某壹特定基因,從而在生物活體內研究此基因的功能。 基因打靶技術是壹種定向改變生物活體遺傳信息的實驗手段,它的產生和發展建立在胚胎幹(ES)細胞技術和同源重組技術成就的基礎之上,並促進了相關技術的進壹步發展。基因打靶技術將廣泛應用於基因功能研究、人類疾病動物模型的研制以及經濟動物遺傳物質的改良等方面。
原理
首先獲得ES細胞系,利用同源重組技術獲得帶有研究者預先設計突變的中靶ES細胞。通過顯微註射或者胚胎融合的方法將經過遺傳修飾的ES細胞引入受體胚胎內。經過遺傳修飾的ES細胞仍然保持分化的全能性,可以發育為嵌合體動物的生殖細胞,使得經過修飾的遺傳信息經生殖系遺傳。獲得的帶有特定修飾的突變動物提供研究者壹個特殊的研究體系,使他們可以在生物活體中研究特定基因的功能。目前,在ES細胞進行同源重組已經成為壹種對小鼠染色體組上任意位點進行遺傳修飾的常規技術。通過基因打靶獲得的突變小鼠已經超過千種(相關數據庫參見文獻),並正以每年數百種的速度增加。通過對這些突變小鼠的表型分析,許多與人類疾病相關的新基因的功能已得到闡明,並直接導致了現代生物學研究各個領域中許多突破性的進展。
實驗流程:見圖片
由上到下
特點
基因打靶技術是壹種定向改變生物活體遺傳信息的實驗手段。通過對生物活體遺傳信息的定向修飾包括基因滅活、點突變引入、缺失突變、外源基因定位引入、染色體組大片段刪除等,並使修飾後的遺傳信息在生物活體內遺傳,表達突變的性狀,從而可以研究基因功能等生命科學的重大問題,以及提供相關的疾病治療、新藥篩選評價模型等。基因打靶技術的發展己使得對特定細胞、組織或者動物個體的遺傳物質進行修飾成為可能。
應用
基因打靶技術在基因功能研究中的應用、應用基因打靶技術研制人類疾病動物模型、應用基因打靶技術改良動物品系和研制動物反應器等。