《貓和老鼠》以鬧劇為特色，描繪了壹對水火不容的冤家：湯姆和傑瑞貓鼠之間的戰爭，片中的湯姆經常使用狡詐的詭計來對付傑瑞，而傑瑞則時常利用湯姆詭計中的漏洞逃脫他的迫害並給予報復
湯姆（貓）
演員?---
總是閃著機會主義的光芒，弓著腰在壹旁等待機會出擊傑瑞。在動畫片中，它總有壹種強烈的欲望，總想抓住與它同居壹室卻難以抓住的老鼠傑瑞。但總是遭到失敗。而實際上它在追逐中的樂趣遠遠超過了抓住傑瑞，即使偶爾抓住了傑瑞，也不知道怎麽處理傑瑞，也許是他們在不知不覺中已經成為對方生活中不可或缺的壹個角色了。
傑瑞（鼠）
演員?---
總是用挑逗的眼神看著鏡頭，並且常常在不經意期間玩弄湯姆。因為傑瑞古靈精怪，所以經常能成功的戲弄湯姆且讓他糗事百出，不過有時他也會被湯姆戲弄，時而在戲弄湯姆的同時也會享受到湯姆對它的關心，讓它感動。
兩只鞋太太（人）
演員?---
動畫中湯姆貓的幾種不同主人中最常出現的壹位，經常處理兩位主角在自己家中所制造的麻煩。由於視角問題，鏡頭只能看到她腰以下的部位。在動畫中的設定大約40歲左右，身材粗壯的大媽形象。1952年之後不再登場。
泰菲（鼠）
演員?---
壹個由傑瑞收養的小灰鼠棄兒，個體嬌小可愛，通常穿白色尿布，非常貪吃，會講法語，無時無刻在賣萌。
泰克（狗）
演員?---
斯派克的兒子，經常被湯姆和傑瑞的打鬧無辜牽連，是斯派克爆打湯姆的主要原因之壹
斯派克（狗）
演員?---
壹只兇猛的鬥牛犬，不管是湯姆有意拿他尋開心、還是捉傑瑞時不小心的、或者是傑瑞栽贓嫁禍的，湯姆總能招惹到他，因此總是被它暴打壹頓。
布奇（貓）
演員?---
壹只骯臟的流浪貓，總想捉到傑瑞，因此有時會與湯姆合作，但更多時候卻與湯姆為敵（大多是成為情敵）。登場的時候經常唱的歌曲是綠野仙蹤的插曲《在彩虹上》。
圖多蓋洛（貓）
演員?---
壹位有富豪千金的母貓，經常在公園上看雜誌，因為她的登場，常常讓湯姆和布奇成為情敵。
萊特寧（貓）
演員?---
首次登場時是與湯姆爭寵為背景的，移動速度如同閃電，後來成為由布奇領導的“流浪貓鐵三角”的壹員，同時失去了閃電移動的能力。
托普斯（貓）
演員?---
流浪貓鐵三角的成員之壹，身材矮小，比較喜歡搞怪。
小鴨子
演員?---
鴨子媽媽的孩子，但也是最容易被忽略、拋棄的壹只鴨子，之後傑瑞會幫助它找回它的媽媽。
金絲雀
演員?---
被關在籠子裏的壹只小金絲雀（常被傑瑞放出），常常幫助傑瑞，是傑瑞的壹位好朋友。由於此角色跟Quacker樣子有些相似，會有人搞錯角色，註意腳和尾巴的區分。（主要看它會不會飛）
笨蛋（貓）
演員?---
壹只棕色的流浪貓，原為流浪貓鐵三角的壹員頭上有壹撮紅色的毛發。
《貓和老鼠》是由湯姆貓和傑瑞鼠搭檔出演的壹部經典短篇動畫劇集。從1940年問世以來，貓和老鼠在國內的火熱程度自然也不言而喻，90年代引進中國後更是得到成為了壹部老少皆宜的動畫片，給壹代又壹代不同年齡、不同國家的觀眾帶來了無數歡樂。這套動畫片完全以鬧劇為特色，情節十分熱鬧，這部“機靈老鼠”與“笨貓”的故事，堪與《米老鼠和唐老鴨》的故事相媲美。
憑心而論，湯姆事實上是比傑瑞更有同情心的，這樣的壹只雖然有著各種各樣的“缺點”的好貓，整天被壹個小小的老鼠弄得狼狽不堪，確實讓人於心不忍。湯姆易怒而敏感，傑瑞則獨立且投機。在每集動畫片的結尾，通常是傑瑞以洋洋自得來顯示自己的勝利，而TOM則是悲壯的失敗者。但是，也有可能出現以下結局：在很少的時候，湯姆會獲得勝利；偶爾也有兩人攜手搭檔的情況。不過，總得來說，湯姆和傑瑞握手言歡只能是小插曲——永無止境的追逐才是湯姆和傑瑞作為存在的永恒主題
當威廉·漢納和約瑟夫·巴伯拉制作出“湯姆”和“傑瑞”這壹對活寶的時候，他們大概沒有想到自己的貢獻有多大。這壹對天生的冤家從誕生開始就註定了他們是給世界帶來歡笑的，而他們是不會隨著時間而褪色的。相反，他們在時間長河裏浸泡越久，他們也會顯得越有魅力，妳也越會被感動。比起那些所謂有深度有意義的動畫來說，湯姆和傑瑞的10分鐘片斷與其相比倒顯得更具光輝