右組由馬修、達泰和西蒙組成。聽到這個令人震驚的消息後，三個人自發地聊起了什麽，三只手都伸到了畫面中央。
中間右組是托馬斯、老詹姆斯、菲利普。托馬斯伸出壹根手指，像是在問老師，“有人想背叛妳嗎？”坐在他旁邊的老雅各布攤開雙手表示驚訝:“這多可怕啊！”年輕的菲利普雙手捂住胸口，好像在說:“妳是不是在懷疑我背叛了老師？”
中間左組的彼得、約翰和猶大是最富表現力的，也是畫中的主要人物。約翰坐在耶穌旁邊，斜著身子，眼睛朝下，雙手十指交叉，虛弱地放在桌子上，做出壹副悲傷的樣子。另壹方面，暴躁的彼得非常情緒化。他從座位上跳起來，似乎在問約翰，誰是叛徒？他手裏拿著壹把剛切完面包的刀，無意中靠近了猶大的肋骨。另壹方面，猶大在聽了耶穌的話後很緊張。他微微後仰，右臂撐在桌子上，右手緊緊抓住錢包，流露出壹種難以抑制的恐慌。這十三個人中，只有猶大臉色陰沈。